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首頁 > 產(chǎn)品中心 > 細(xì)胞治療 > 轉(zhuǎn)染試劑 > GX100B晶欣生物 重組人纖粘連蛋白片段 轉(zhuǎn)染 現(xiàn)貨

晶欣生物 重組人纖粘連蛋白片段 轉(zhuǎn)染 現(xiàn)貨

簡要描述:晶欣生物 重組人纖粘連蛋白片段 轉(zhuǎn)染 現(xiàn)貨  產(chǎn)品貨號:GX100B 
產(chǎn)品組分:重組人纖粘連蛋白 2.5mg,該試劑以1 mg/ml 溶液形式提供。【含有12.5 mM檸檬酸鈉(pH 6.2)和1.25%蔗糖的無菌溶液。】
儲存條件:-20℃
注意:(1)最多可凍融10次。
          (2)不要劇烈混合溶液。不要渦旋。

  • 產(chǎn)品型號:GX100B
  • 廠商性質(zhì):代理商
  • 更新時間:2022-09-22
  • 訪  問  量:1155
詳細(xì)介紹
品牌其他品牌貨號GX100B
規(guī)格2.5mg供貨周期現(xiàn)貨
主要用途細(xì)胞治療應(yīng)用領(lǐng)域醫(yī)療衛(wèi)生,生物產(chǎn)業(yè)

晶欣生物 重組人纖粘連蛋白片段 轉(zhuǎn)染 現(xiàn)貨  產(chǎn)品貨號:GX100B 

產(chǎn)品組分:重組人纖粘連蛋白 2.5mg,該試劑以1 mg/ml 溶液形式提供。【含有12.5 mM檸檬酸鈉(pH 6.2)和1.25%蔗糖的無菌溶液。】

儲存條件:-20℃

注意:(1)最多可凍融10次。

      (2)不要劇烈混合溶液。不要渦旋。

產(chǎn)品介紹:

該重組人纖維連接片段(rFN-CH-296),由三個功能結(jié)構(gòu)域組成:細(xì)胞結(jié)合域 、肝磷脂結(jié)合域和CS1位點(diǎn)。該片段通過協(xié)助靶細(xì)胞和病毒粒子的共定位來增強(qiáng)逆轉(zhuǎn)錄病毒介導(dǎo)的基因轉(zhuǎn)導(dǎo)。其作用原理是:逆轉(zhuǎn)錄病毒載體與肝磷脂結(jié)合域結(jié)合,細(xì)胞表面VLA-5 VLA-4分別與該纖連蛋白的細(xì)胞結(jié)合域  CS-1位點(diǎn)結(jié)合。

在經(jīng)重組人纖粘連蛋白片段包被的培養(yǎng)容器表面,細(xì)胞與病毒載體高濃度共存,從而提高基因感染效率。

感染方案:

1.逆轉(zhuǎn)錄病毒與該重組人纖粘連蛋白片段包被的培養(yǎng)板結(jié)合,去除逆轉(zhuǎn)錄病毒上清液后加入靶細(xì)胞。但去除上清液會減少抑制性分子(例如,從生產(chǎn)細(xì)胞分泌的分子,如蛋白聚糖、病毒包膜蛋白),從而降低病毒介導(dǎo)的基因轉(zhuǎn)導(dǎo)效率。

2.細(xì)胞與病毒上清液混合并結(jié)合到重組人纖粘連蛋白片段包被的培養(yǎng)板上。

兩種方案均可用于有效的基因轉(zhuǎn)導(dǎo)。盡管方案1廣泛適用,但具體實(shí)驗(yàn)方案可能仍需根據(jù)靶細(xì)胞、載體、靶基因進(jìn)行修改。

需要準(zhǔn)備設(shè)備:

未經(jīng)處理的組織培養(yǎng)板或培養(yǎng)皿

電動移液器

移液器

無菌移液器

帶濾芯的無菌吸頭

生物安全柜或超凈工作站

顯微鏡

二氧化碳培養(yǎng)箱

孔板離心機(jī)

試劑:

無菌PBS(-)

 HBSS/Hepes (Hank's Balanced Salt溶液,添加2.5% (v/v)1 M Hepes)

 2%牛血清白蛋白(BSA Fraction V) /PBS 溶液

晶欣生物 重組人纖粘連蛋白片段 轉(zhuǎn)染 現(xiàn)貨  產(chǎn)品貨號:GX100B 

實(shí)驗(yàn)方案:

1. 重組人纖粘連蛋白片段包被培養(yǎng)板的制備

將重組人纖粘連蛋白片段包被于培養(yǎng)板上,濃度20-100μg/ml的重組人纖粘連蛋白片段可達(dá)到4-20μg/cm2的包被密度。

1)包被前,用無菌PBS將該溶液稀釋至20-100μg/ml。【請?zhí)崆坝嬎阒亟M人纖粘連蛋白試劑的用量,如:2.25ml濃度為20μg/ml的重組人纖粘連蛋白溶液放入直徑為35mm的培養(yǎng)皿(9cm2)中時,用于包被的密度為5μg/cm2

注意:為避免重組人纖粘連蛋白片段丟失,請勿將PBS稀釋的重組人纖粘連蛋白溶液過濾除菌。

2)將適當(dāng)體積(24孔板中每孔0.5 ml,或6孔板每孔2 ml。)的無菌重組人纖粘連蛋白溶液分配到每個板中,讓板在室溫下靜置2小時或在4℃過夜。

注意:在此步驟中應(yīng)使用未經(jīng)處理的細(xì)胞培養(yǎng)級組織培養(yǎng)板或培養(yǎng)皿。

3)移除重組人纖粘連蛋白溶液,然后用適量含無菌2%牛血清白蛋白(BSAFraction V)PBS溶液進(jìn)行封閉(24孔板中每孔0.5 ml,或6孔板每孔2 ml),讓板在室溫下靜置30分鐘。

4)移除BSA溶液,用適當(dāng)體積的HBSS/HepesPBS清洗一次。除去洗滌液后,即可使用。重組人纖粘連蛋白片段包被板可用封板膜密封,并在4℃下儲存周。

2.基因轉(zhuǎn)導(dǎo)

使用重組人纖粘連蛋白試劑進(jìn)行基因轉(zhuǎn)導(dǎo)的方法有兩種:重組人纖粘連蛋白結(jié)合病毒感染法(A方法)和上清液感染法(B方法)。在A方法中,逆轉(zhuǎn)錄病毒顆粒首先結(jié)合到涂有重組人纖粘連蛋白試劑的板上,去除病毒上清液后加入靶細(xì)胞。在B方法中,將病毒溶液和靶細(xì)胞混合,然后添加到重組人纖粘連蛋白片段包被板中。

如果病毒溶液未經(jīng)純化直接用于病毒感染,可能會因?yàn)槲廴緦?dǎo)致基因轉(zhuǎn)導(dǎo)效率降低。在這種情況下,推薦使用A方法,通過將病毒與重組人纖粘連蛋白試劑結(jié)合并去除上清液來去除抑制物。

注意: 本產(chǎn)品僅用于研究,不用于治療或診斷此外,切勿將本產(chǎn)品用作食物、化妝品或家庭用品等。

上海華雅思創(chuàng)生物科技有限公司是一家為生命科學(xué)領(lǐng)域內(nèi)的科學(xué)研究、細(xì)胞治療和生物制藥相關(guān)人員提供優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品和服務(wù)的生物高科技公司,干細(xì)胞治療產(chǎn)品、細(xì)胞培養(yǎng)試劑耗材、臍帶MSC間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)基、IPS細(xì)胞ES胚胎干細(xì)胞培養(yǎng)基、DC細(xì)胞淋巴細(xì)胞無血清培養(yǎng)基、R&D細(xì)胞因子等種類豐富的產(chǎn)品;涉及StemCell、HY StemCell、StemRD、CellGenix、PeproTech、Corning、Thermo、Gibco、 PALL、LONZA、BD等國際公司品牌和。以“Yes Service"核心服務(wù)理念,緊緊圍繞“Yes Service focus on Biology 服務(wù) 專注生物"打造中華民族全新服務(wù)體系,我們與客戶攜手一起探索生命科學(xué)奧秘,解決人類健康問題,發(fā)展綠色環(huán)保生態(tài),推動世界和諧持續(xù)發(fā)展。

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